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細胞增殖

簡要描述:細胞增殖是生物體的重要生命特征,單細胞生物以細胞分裂的方式產(chǎn)生新的個體,多細胞生物以細胞分裂的方式產(chǎn)生新的細胞,用來補充體內(nèi)衰老和死亡的細胞。

  • 更新時間:2024-10-26 00:00:00
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詳細介紹

1、CCK-8

CCK-8常應用于檢測細胞的增殖能力。CCK-8試劑中含有WST–8:化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan)。生成的甲臜物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比,用酶標儀在450nm波長處測定其吸光度值(OD值)來判斷活細胞數(shù)量,OD值越大,細胞活性越強(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。

2、平板克隆

單個細胞在體外增殖6代以上(時間約1周以上),其后代所形成的細胞群體,稱為集落或克隆。每個克隆含有50個以上的細胞,大小在0.3-1.0mm之間。細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數(shù),但貼壁后的細胞不一定每個都能增殖并形成克隆。只有同時具有貼壁和增殖活力的細胞才會形成克隆。克隆形成率反映細胞的獨立生存能力的強弱,用于評價細胞群體依賴性和增殖能力。由于細胞生物學性狀不同,細胞克隆形成率差別也很大,一般初代培養(yǎng)細胞克隆形成率弱,傳代細胞系強; 二倍體細胞克隆形成率弱,轉(zhuǎn)化細胞系強;正常細胞克隆形成率弱,腫瘤細胞強。克隆形成率與接種密度有一定關(guān)系,做克隆形成率測定時,接種細胞一定要分散成單細胞懸液,直接接種在培養(yǎng)皿中,持續(xù)一周以上,隨時檢查,到細胞形成克隆時終止培養(yǎng)。

3、BrdU

溴脫氧尿苷(5-溴代-2'-脫氧尿苷, BrdU) 是一種合成的核苷酸即胸苷的類似物。BrdU通常被用于檢測活組織中再生的細胞。BrdU可以摻合到復制細胞中新的合成DNA中(在細胞周期S期),在DNA復制可代替胸苷。利用抗BrdU的特異性抗體便可以用于檢測這個插入的化學品,從而檢測出細胞是否在復制其DNA。

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