免疫熒光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantibodytechnique)。 用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱免疫熒光技術,因為熒光色素不但能與抗體球蛋白結合,用于檢測或定位各種抗原,也可以與其他蛋白質結合,用于檢測或定位抗體,但是在實際工作中熒光抗原技術很少應用,所以人們習慣稱為熒光抗體技術,或稱為免疫熒光技術。以熒光抗體方法較常用。用免疫熒光技術顯示和檢查細胞或組織內抗原或半抗原物質等方法稱為免疫熒光細胞(或組織)化學技術。
操作方法:
1首先,免疫熒光法 ,是預先將熒光素標記在抗體上,再與涂片、切片上或細胞懸液中的抗原進行反應。借助于交光顯微鏡能夠觀察,是否存在相應的抗原,并確定相應的位置。用該方法來檢測斑節對蝦排準物所存在的包體。病毒包酒體在熒光顯微鏡下綠色熒光或樓紅色。
2然后,免疫熒光法需要特殊設備,不易做定量分析,而且對結果判定有一定的主觀性。
3反向間接血凝實驗RIHA,是將特異性抗體與抗原連接到,適當處理過的哺乳動物紅細胞表面。通過抗體與抗原之間的特異性結合反應介導血細胞的凝結,從而達到檢測相應抗原目的的一種簡便免疫學診斷技術。
4從鱗翅目昆蟲建立首株細胞后,對蝦組織細胞培養技術,昆蟲的組織培養研究進一步活躍起來。
5發展對蝦組織培養技術,不僅對深人研究對蝦病毒提供了方便,而且也為對蝦免疫學、遺傳學、細胞工程學等方面研究提供了有利條件。
6最后,由于目前還沒有控制對蝦病毒病的有效藥物,可利用組織培養篩選抗病毒藥物。利用對蝦組織培養,還可以制備病毒疫苗及為核酸探針檢測病毒提供條件應用T CID5來測定YBV 的感染滴CIDSO病毒滴定法度,被感染組織為用96孔組織培養板培養的蝦淋巴器官細胞。