1. SD 大鼠稱重麻醉；

2. 固定大鼠，牽拉上下頜，使開口最大，牽出舌頭，防止舌后墜窒息；

3. 分離左右側上頜第二磨牙的牙齦，暴露牙間隙；

4. 用直徑0.25 mm 正畸不銹鋼金屬結扎絲, 穿過牙間隙結扎在左右側上頜第二磨牙的牙頸部；

5. 大約4周出現牙周炎癥狀。