大鼠面神經(jīng)核位于延髓腹外側(cè)部,呈吻尾稍長(zhǎng),背腹扁的橢圓體。大鼠面神經(jīng)核吻尾長(zhǎng)約1.6mm,平均體積約1.293mm3。大鼠面神經(jīng)核內(nèi)的細(xì)胞常聚集成幾個(gè)亞群,各細(xì)胞亞群與外周面神經(jīng)分支分布的關(guān)系已有研究。然而,由于面神經(jīng)核小,其取材是個(gè)難題,今天我們來介紹大鼠面神經(jīng)核取材的簡(jiǎn)易方法。
1. 大鼠麻醉,固定到腦立體定位儀上。
2. 確定Bregma點(diǎn)。
3. 參考《大鼠腦立體定位圖譜》,確定面神經(jīng)核的位置。
4. 在Bregma-9.80mm的位置左右轉(zhuǎn)兩孔,然后在Bregma-12.30mm的位置左右轉(zhuǎn)兩孔。
5. 從立體定位儀上移下大鼠,心臟灌流, 灌注完畢后,剝除顱骨,記下小腦上4個(gè)打孔位置,取出整體的大腦、小腦及腦干。
6. 依據(jù)小腦上4個(gè)孔的位置,用手術(shù)刀片平行切兩刀,如上圖,然后用4%的多聚甲醛后固定,冰凍切片,片厚10um。
7. 將切好的標(biāo)本,光學(xué)顯微鏡下觀察,確認(rèn)是面神經(jīng)核后,HE染色,拍照。
8. 大鼠面神經(jīng)核大量取材,取下整體的大腦、小腦及腦干后,依據(jù)上述經(jīng)驗(yàn),直接取材即可。
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